成熟SVFs细胞与Hepa1-6细胞共培养模型的建立及对肝细胞脂代谢的影响

目的：建立小鼠成熟脂肪细胞血管基质（stromal vascular fraction，SVF）和小鼠肝细胞（Hepa 1-6）共培养模型，研究成熟脂肪细胞对肝细胞脂质积累和代谢的影响。方法：从小鼠皮下脂肪中分离原代SVF细胞。体外分化成熟后，在Transwell培养箱中建立了成熟SVF细胞与Hepa1-6细胞的间接共培养体系，共培养48小时。反转录聚合酶链反应法（RT－PCR法）用于检测SVF细胞中PPAR和PGC－1等分化相关基因的表达，以及Hepa1-6细胞中CD36、fatp2、GPAT1和其他脂质代谢相关基因的表达。采用酶法检测Hepa1-6细胞共培养后甘油三酯水平。结果：诱导成熟后，小鼠原代SVF细胞体积明显增大。成熟SVF细胞中的PPAR（PPAR）和PGC－1（irraq）等分化标记物显著高于未分化SVF细胞。Hepa 1-6细胞的甘油三酯水平显著高于非共培养组。Hepa1-6细胞中GPA、T1和CD36的基因表达水平明显较高。结论：成功建立了成熟脂肪细胞与Hepa1-6细胞共培养模型。肝细胞与成熟脂肪细胞共培养可诱导脂肪积累增加，这可能是通过上调肝细胞中CD36和GPAT1的表达水平，增加脂肪酸吸收和甘油三酯合成途径实现的。