Bmal1调控T型钙离子通道对慢性心衰室性心律失常昼夜节律的影响

目的：探讨生物钟基因Bmal1T型T型钙离子通道（TTCC）对慢性心衰（CHF）和室性心律失常（ventricular　arrhythmia，VA）昼夜节律的影响及其可能的调节机制。方法：在主动脉缩窄术（TAC）建立C57BL／6J小鼠慢性心力衰竭模型（CHF），并建立假手术对照组（CON）和TTCC抑制剂米贝拉地尔（MIB）治疗组（CHF+MIB）。通过心脏超声评估各组小鼠的心脏功能，并通过免疫组织化学染色法（IHC）和蛋白免疫印迹法法（WB）测量TTCC在心肌中的表达。室性心律失常（VA）由程序性电刺激诱发（PES）。采用WB和QRT-PCR检测心肌组织BmaL1和TTCC的昼夜节律变化及其相互关系。ChIP的use染色质免疫共沉淀n技术揭示了Bmal1调控TTCC的分子机制。结果：与CON组相比，CHF小鼠心脏收缩功能明显降低，心腔扩大，心肌肥厚明显，心肌中性显著增强。PES试验表明，CHF小鼠VA发病率显著增加，且昼夜节律存在差异。MIB的使用可以在一定程度上降低CHF小鼠VA的发病率。Western　blot、qRT－和PCR的研究结果表明，Bmal1和TTCC在CHF小鼠心肌中的表达呈现昼夜节律。对ChIP的检测表明，Bmal1号可以直接结合启动子TTCC的e-box位点来调节TTCC的转录。结论：TTCC通道在CHF小鼠中高度重新表达，并具有昼夜节律。MIB的使用可以减少CHF小鼠的VA攻击，Bmal1可以通过直接结合TTCC启动子的e-box位点来调节TTCC的转录。