基于UPLC-MS法快速定量检测人血浆中短链脂肪酸
作者：赵海燕; 黄婷婷; 陆金玲; 陈宇昕; 王少兵
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目的：建立3－硝基苯肼化学衍生化和UPLC-Ms快速测定人血浆中短链脂肪酸（SCFAs）的方法。方法：用5倍甲醇沉淀蛋白质后，向上清液中加入3－硝基苯肼（3-NPH）和EDC进行衍生化反应。考察了反应时间、温度和反应物浓度对衍生产物峰面积的影响，优化了反应条件。11个SCFAs通过水采集UPLC柱与乙腈-甲醇（V（乙腈）分离∶ V（甲醇）=2∶ 1） 结果：最佳反应条件为25个mmol·L-13NPH为衍生化试剂，30个mmol·L－1EDC作为催化剂，40个反应和30个min。11座SCFAs的基线分离可以在11个min内实现。衍生产品的峰面积和浓度具有良好的相关性（r>0.999），日内和日间精密度良好（RSD低于15%），回收率在80%~120%的范围内提取。结论：衍生化法反应条件温和，操作简单。UPLC-MS/MS方法准确、简便、重复性好，可用于人血浆中SCFAs的测定