6-姜酮酚抑制肝内胆管癌细胞的增殖、迁移、侵袭作用及其机制探讨

目的研究6-姜酮酚（6-Paradol）对人肝胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法用不同浓度的6-平行等体积DMSO处理人胆管癌细胞株h-Aristole 9810和HUCCT1（对照组）。通过CCK－8、平板克隆、划痕愈合和Transwell试验检测它们的增殖、迁移和入侵。生物信息学软件Swiss target prediction用于预测6-paradol的蛋白质靶标。Western　blot用于检测Bcl－2和p53的STAT3号、p-STAT3号、SRC、p-mTOR、p21蛋白表达水平。药物亲和力反应实验（DARTS）用于探索6-帕拉多和STAT3之间的相互作用。分别用STAT3或sh－p21质粒转染胆管癌HCCC 9810和hucct1细胞后，使用QRTPCR检测各组细胞中STAT3和p21的表达水平，Western　blot检测STAT3和p21的蛋白表达。CCK－8、划痕愈合和Transwell试验检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力。两组测量数据之间的比较采用t检验，多组之间的比较采用方差分析，两组之间的进一步比较采用LSD－t检验。结果与对照组相比，6-帕拉多治疗组细胞的增殖、迁移和侵袭均显著减少（均<0.05）。6-Paradol处理组细胞的STAT3和p-STAT3的表达水平显著低于对照组（P值<0.05），而p21的表达水平显著高于对照组（P值<0.05）<0.05），而在Bcl－2、SRC和P值，p-mTOR的表达水平没有显著变化（均>0.05）。在6-Paradol治疗组中，蛋白酶水解的STAT3的比例分别下降了48.66%和45.33%（T值分别为16.64和8.76，P<0.05），胆管癌细胞中STAT和mRNA的水平显著增加（tHCCC9810=2.82，tHUCCT1=5.60，P<0.05），p21和mRNA显著下降（tHCCC9810=6.84，tHUCCT1=3.91，P<0.05）。CCK－8的结果显示，6-帕拉多治疗48和72小时后，HCCC 9810细胞和HUCCT1细胞-STAT3中部过度表达组的增殖率显著高于单次给药组，p21沉默组增殖率的增殖率也显著高于单次给药组（P值<0.05）。划痕愈合实验结果显示，过度表达STAT3或沉默p21的HCCC9810和HUCCT1细胞的划痕愈合率显著高于单次给药组（P<0.05）。Transwell实验结果显示，过度表达STAT3或沉默p21的HCCC9810和HUCCT1细胞的迁移率显著高于单次给药组（P<0.05），过表达STAT3或沉默p21的HCCC9810和HUCCT1细胞的侵袭率显著高于单次给药组（P<0.05）。结论6-paradol在STAT通过作用于3-p21通路的靶向抑制胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。