骨髓间充质干细胞浓度调节Treg/Th17表达的研究

目的研究骨髓间充质干细胞（BMMSCs）浓度对调节性T细胞（Treg）/辅助性T细胞17（Th17）表达的影响。方法从壁法提取大鼠BMMSCs，传代至P4代。在油红O染色法和钙盐染色法测量了P3代成脂和钙盐染色法的成骨能力。倒置显微镜用荧光抗体标记CD29号、CD90和CD45。采用磁珠法对大鼠进行分选，并测定细胞纯度。CD4＋T细胞与不同浓度（0.5倍、1倍、2倍和4倍浓度组）的BMMSCs共培养3天。在流式细胞仪测量Treg和Th17的增值率，并通过流动微球分析检测转化生长因子（TGF）和白介素（IL－6、IL－10和IL－17）的水平。结果在本研究中，P4一代BMMSCs的形状是均匀的，紧密排列成纺锤形。脂肪生成诱导后，他们显示橙色脂肪小滴，成骨诱导后，他们显示黑色钙结节。CD90和CD29号在BMMSCs表面呈阳性，在CD45呈弱阳性。用磁珠法分离出约（5.750.36）106个细胞/ml，细胞纯度大于95%。共同培养后，在Treg的增殖率方面，两倍浓度组与其他组相比有显著性差异（P<0.05）。就Th17的增殖率而言，1倍>2倍>0.5倍>4倍浓度组、0.5倍浓度组和各组、4倍浓度组和1倍和2倍浓度组之间存在显著差异（P<0.05）。在TGF水平，1倍>2倍>4倍>0.5倍浓度组与0.5倍和4倍浓度组之间存在显著差异（P<0.05）。在IL－10水平，2倍>1倍>4倍>0.5倍浓度组和0.5倍浓度组之间存在显著差异（P<0.05）。在IL－6和IL－17的水平上，两组之间没有显著差异（P>0.05）。结论BMMSCs具有多向分化潜能。CD4＋T细胞对Treg和Th17的扩散率受BMMSCs浓度的影响。高浓度时增殖效应最强，高浓度时增殖受到抑制。增殖率的变化与相关因子的表达水平不同步。