番茄斑萎病毒2个非结构蛋白VIGS体系的初步构建
作者:杨婷婷; 赵立华; 邱润霜; 陈思; 张洁; 李博文; 张仲凯; 马长乐
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番茄斑萎病毒(TSWV)的NSm、NSsgene 200和bp都是在pTRV-PTV00沉默载体上建造的,本氏的烟雾渗透到农杆菌GV3101。注射大约10天后,被注射PDS基因的植株变白。注入pTRV-PTV00-NSm、pTRV-PTV00-NSs和pTRV-PTV00载体的植物被接种到TSWV。疾病明显后,采集系统的叶片(接种叶片的上部叶片)应用于实时荧光定量PCR,以检测NSm和NSs基因表达量。通过对NSm和NSs基因表达量的测量,发现NSm基因的沉默效率为86.7%,NSs基因为92.00%。结果表明,通过在pTRV和PTV00载体修建NSm,NSs基因沉默载体的消声效率接近90.00%。该载体适用于病毒基因沉默载体的构建,NSm和NSs基因沉默载体可用于后续的基因功能研究。
