猪圆环病毒4型Cap蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为了制备猪圆环病毒4型（pcv4）Cap蛋白单克隆抗体，用原核表达的重组Cap蛋白免疫6-8周龄小鼠。三次免疫后，免疫小鼠的脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合。通过亚克隆技术和间接免疫荧光（IFA）方法筛选出两株阳性单克隆杂交瘤细胞系，分别命名为5h9和2-F3。在间接免疫荧光和Western　blot的试验表明，这两种单抗在特异性识别293T细胞可以特异表达Cap蛋白，在F3的5h9和2的效价分别为112800和16400。亚类鉴定结果表明，两株单抗的重链均为IgG 1型，轻链型为kappa型。本研究制备的Cap特异性抗PCV4单克隆抗体，不仅为建立PCV4检测方法和流行病学调查提供了有效的生物材料，而且为病毒的分离鉴定和Cap蛋白功能的探索奠定了基础。